设计引物时，需考虑长度碱基分布Tm值GC含量等要素，而TaqMan探针设计则更注重探针的特异性和荧光淬灭的规避八专业服务与指导 信诺金达提供专业的qPCR检测服务，丰富的经验确保了快速准确的结果对于分子生物学细胞。

根据Realtime qPCR的化学发光原理可以分为2大类一类为探针类，包括TaqMan@探针和分子信标，利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加一类为非探针类，其中包括如SYBR Green或者特殊设计的引物如LUX Primers 通过。

Tm值太高了只是逆转录的话，只要能逆转录出来，再用pcr扩就好了，特异性不用太讲究。

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否要设计引物首先要找到DNA序列的保守区同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构如。